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移動PCR實驗室如何避免以及處理實驗室汙染

添加時間:2022-09-02 12:28         瀏覽次數:         來源:移動PCR實驗室

PCR檢測因其高靈敏度、快速、操作方便等優勢已經被廣泛應用,不過正是由於它靈敏度極高,極微量的汙染源都有可能導致檢測結果的假陽性,移動PCR實驗室如何避免以及處理實驗室汙染?

移動PCR實驗室汙染分類:樣本間交叉汙染,主要是在采(取)樣的過程中,由於取樣工具之間的交叉造成汙染;或者在核酸提取的過程中,由於移液器、離心管等使用不當導致的汙染。PCR試劑的汙染,主要是在PCR試劑配製過程中,由於移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照汙染。克隆質粒的汙染,在實驗室操作中經常會用到陽性參考品,這些陽性參考品大多數是由某些克隆質粒製作而成,克隆質粒在單位容積內濃度高,不小心使用極易造成汙染。PCR擴增產物汙染.這是PCR反應中最主要最常見的汙染問題。因為PCR產物拷貝量大,遠遠高於PCR檢測數個拷貝的極限,所以極微量的PCR產物汙染,就可造成假陽性結果。還有一種容易忽視,最可能造成PCR產物汙染的形式是氣溶膠汙染,在空氣與液體麵摩擦時就可形成氣溶膠,據計算一個氣溶膠顆粒可含4.8萬拷貝,因而由其造成的汙染是一個值得特別重視的問題。


移動PCR實驗室消除汙染的操作步驟:購買噴壺(能夠噴出霧狀水汽的即可);有效氯消毒片,根據要求配製不同濃度的消毒液,或者購買成品次氯酸鈉消毒液配製合適濃度消毒水;核酸氣溶膠汙染清除劑。無紡布/無塵紙等。


移動PCR實驗室汙染處理方法:清理廢液缸並且對廢液缸用有效氯含量為2000mg/L消毒水浸泡消除核酸汙染;用有效氯含量為2000mg/L消毒水對移液槍進行擦洗,關鍵部位為移液槍前端易汙染部位,清潔幹淨後用潔淨水再擦拭一遍;將離心管架、擴增管架、擴增管架底板、吸嘴盒及其他相關物品用有效氯含量為500mg/L的消毒水浸泡2小時後,用清水衝洗幹淨晾幹後使用;對汙染區域內的設備如擴增儀、全自動提取儀等,使用核酸氣溶膠汙染清除劑進行反複處理;對生物安全櫃等含有空氣過濾係統的設備,需更換過濾網;用有效氯含量為500mg/L的消毒液對整個實驗室(地板、牆麵、天花板、門、窗戶等地方)進行清潔,並且用用有效氯含量為1000mg/L的消毒水對實驗室進行噴霧消毒(重點部位為操作區),有效降解空氣中的氣溶膠與附著在實驗台表麵的核酸汙染;同時加大通風量(內循環無用,盡可能外循環);待汙染區域及設備器件清理完成後,常用設備和操作台麵使用移動紫外消毒車近距離輻照1小時;實驗室內則使用室內紫外燈整晚輻照。步驟(1)-(6)必須堅持每天進行,確保消除實驗室汙染。


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